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主题 : 中国科学院遗传与发育生物学研究所博士研究生生物化学入学试题

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楼主发表于: 2008-10-18

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中国科学院遗传与发育生物学研究所博士研究生生物化学入学试题

中国科学院遗传与发育生物学研究所博士研究生生物化学入学试题1996年

1. 请根据功能对蛋白质分类，并举例说明。（10分）
2. DNA的变性与蛋白质变性有何不同，理由是什么？（10分）
3. 列出你所知道的具有DNA外切酶活性的酶及它们在分子生物学研究中的应用。（10分）
4. 举例说明蛋白质天然构象的信息存在于氨基酸顺序中。（12分）
5. 以图示说明：（22分）
a.真核生物基因表达的调节，指出哪些在细胞核中进行，哪些在胞质中进行。
b.哺乳动物的ATP循环，请解释为什么说ATP是“自然界的货币”。
6. 如何运用DNA序列分析方法确定DNA序列中与蛋白质结合的区域？（12分）
7. 生物膜的不对称的拓扑结构是由什么维持的？它对生物膜的哪些功能是必需的？（12分）
8. C3植物和C4植物有何差别？有人提出用基因工程手段将C3植物改造成C4植物，你觉得是否可行？为什么？（12分）

1997年

一、名词解释：（40分）
1、蛋白质的去折叠与再折叠 5、RNA－酶
2、差向异构体 6、抗体酶
3、冈崎片段 7、Z－DNA
4、信号肽 8、酮体

二、何谓同工酶？试述同工酶分析的原理及应用。（12分）

三、简述生物膜流体镶嵌模型的要点。什么是膜脂的多形性，非双脂层结构的生理意义是什么。（12分）

四、什么是反义RNA？举例说明它的理论和实践意义。（12分）

五、列举四种不同类型的PCR技术的原理及应用。（12分）

六、影响DNA变性和复性的条件是什么？如何根据DNA复性和反应动力学分离基因组中重复频率不同的序列？（12分）

1998年

一、名词解释：（40分）
1. 糖蛋白和蛋白聚糖
2. 多酶体系
3. 共价催化
4. A、B和ZDNA
5. 糖异生
6. 非蛋白质性氨基酸
7. 蛋白质的四级结构
8. 离子泵
9. 逆转录转座子（retrotransposon）
10.亲和层析

二、哪种类型的蛋白质适用于系统学研究？为什么？比较在系统学研究中的依据蛋白质分析的技术和依据DNA分析的技术。（15分）

三、阐明核酸变性的特点及此特点为分子生物学研究提供的实验方法及可能解决的问题。（12分）

四、图示多肽合成后的空间输送中信号肽的识别过程。（9分）

五、什么是酶活性中心？如何判明酶活性中心？（12分）

六、请阐明基因组和蛋白质组概念及两者的关系，如果已知某物种的基因组全序列是否表示该物种的蛋白质组也已破译?（12分）

1999年

1. 简述决定蛋白质构象的作用力。（8分）

2. 举例说明蛋白质结构的可逆变化与该蛋白质功能间的关系。（14分）

3. 跨膜运送中主动运送与被动运送的区别及生物学意义。（14分）

4. 肽聚糖的结构及在机体中的功能。（14分）

5. 简述影响细胞中某一基因表达的因素。（14分）

6. 举例说明作为调节蛋白的蛋白激酶在生命活动中的作用。（14分）

7. 近十年来发现了十余种生长因子，例如，表皮生长因子、神经生长因子等，你能说出他们的共同点吗？（8分）

8. 简述后基因组（蛋白组）的主要研究策略。（14分）

2000年

1．酶蛋白的构象决定了酶对底物的专一性，请描述并图示酶与底物相互关系的几种学说。（20分）

2．什么是DNA的半保留复制和半不连续复制？如何证明？真核细胞与原核细胞的DNA复制有何不同？（20分）

3．概述可作为纯化依据的蛋白质性质及据此发展的方法。（20分）

4．简述酵解和发酵两个过程并说明两者的异同。（15分）

5．吃多了高蛋白食物为什么需要多喝水？（10分）

6．在非极端环境的生物体中是否存在氰化物不敏感的呼吸作
用？如果有，其可能的生物学意义是什么？（5分）

以下两题中任选一题（10分）
7．概述植物或微生物细胞感应（应答）环境刺激因子（如养分
缺乏、热、冷、干旱、强光等）的可能的生物化学过程模式。

8．细胞编程性死亡又称细胞凋亡是细胞的一种基本生命现象，
请阐述细胞凋亡的生物学意义及主要生物化学特征。

2001年

1. 请阐明蛋白质间最重要的原子相互作用。（15分）

2. 蛋白质的测活是蛋白纯化过程中的重要组成部分，可以从哪些方面来考虑建立一个快速、简便、定量的测活方法。（15分）

3. 质膜是细胞的第一屏障，请概述小分子通过质膜的转运机制。（15分）

4. 举例说明蛋白质三级结构决定于它的氨基酸结构。（15分）

5. 运用免疫学的方法能开展哪些分子生物学研究？（15分）

6. “一个基因一个蛋白”的说法对吗？为什么？（12分）

7. 请从生化角度评论目前市售的“核酸营养液”。（13分）

2002年

注：请将试卷写在答题纸上；不用抄题，但要写请题号；草稿纸上答题无效。
一、名词解释：（20分）
1. 同源蛋白质 (homologous protein)
2. 构型 (configuration)
3. 构象 (conformation)
4. 钙调蛋白 (calmodulin, CAM or CaM)
5. 逆转座子 (retrotransposon)
二、以动物细胞或植物细胞为例说明细胞中的膜结构及其功能。（12分）
三、在研究位置基因的功能时往往采用推定的该基因所编码的氨基酸序列与已知功能的蛋白质的氨基酸序列比较来推断，你认为这种比较应采用什么原则？为什么？（12分）
四、真核基因在原核细胞中表达的蛋白质常常失去生物活性，为什么？举例说明。（12分）
五、简述信号肽的结构特点、功能和从蛋白质产物中切除的机理。（12分）
六、分子筛、离子交换和亲和层析是三种分离、醇化蛋白质的方法，你如何根据所要分离、纯化的蛋白质的性质选择使用。（12分）
七、酶联免疫吸附实验（ELISA）的基本原理是什么？如何用此方法检测样品中的抗原和抗体？（12分）
八、某一个蛋白，SDS凝胶电泳表明其分子量位于16900于37100标准带之间，当用巯基乙醇和碘乙酸处理该蛋白后经SDS凝胶电泳分析仍得到一条带，但分子量接近标准带13370处，请推断此蛋白质的结构？为什么第二次用前要加碘乙酸？（8分）

2003年

一、简要解释下列名词（每词5分，共30分）
1、寡糖与多糖 2、端粒酶
3、酮体 4、生糖氨基酸与生酮氨基酸
5、终止子和终止因子 6、分子伴侣（molecular chaperone）

二、以下问答题任选7题回答（每题10分，共70分）：
1、简述关于生物膜运输的分子机制的几种主要假设以及他们间的相互关系。
2、蛋白质磷酸化和去磷酸化的生物学意义是什么？
3、请解释酶促反应的前馈和反馈（feedforward 和 feedback）及其意义。
4、什么机制保证了DNA复制的准确性？
5、神经和肌肉等细胞活动的直接供能者是ATP。然而，ATP在细胞中含量很低，在哺乳动物肌肉中仅3 - 8mmol / kg。问：是否存在其它的贮能物质，又是怎样“运作”的呢?
6、为什么C4植物即使在大气CO2 浓度很低时其光合效率仍很高？
7、逆转座子广泛存在于真核生物基因组中，简述它的生物学意义并说明原因。
8、DNA重组中同源重组是最基本的重组方式，它的过程是什么？有什么意义？
北大1988年生物化学
一，选择题
1，用茚三酮试剂确定氨基酸是靠它与下面（）功能集团起作用。
2，影响酶催化效率的因素是（）。
3，在适当条件下，盐酸胍变性球蛋白的可逆性，可证明（）。
4，蛋白质中形成肽键平面的原因是（）。
5，三个氨基酸（Asp,Leu,Lys）的混合物，经过一个sulphonoted polysturene 阳离子交换
树脂粒，用PH5的缓冲液洗脱，洗脱液中氨基酸出现的顺序是（）。
6，溶液A的PH为7.0，溶液B的PH为6.0的两个溶液的体积相等，则其H+的含量关（）
。
7，0.01N醋酸的PH为3.4，0.01N HCl的PH是 2，用0.01N NaOH分别去中和15mL的以上醋酸和
盐酸，试问需用（）NaOH。
8,酶活性的国际单位（I.U.）定义为在30。C下，将底物转化为产物，在（）速度时
的酶量。
9，在PH5.0的经DEAE-纤维素柱纯化酶，此酶的比活从2.2U/mg提高到303U/mg，表明（
）
10，10-5毫克分子的乳酸脱氢酶，每秒催化10微克分子丙酮酸的生成，此酶的turnover num
ber 是（）。
11，胰凝乳蛋白酶中电荷延迟系统是指（）。
12，在整体代谢的调节环节调节中，别构效应可调节（）。
13，A因子存在时，一个酶的初速度对底物浓度曲线为S形，而当A因子浓度增高时，此线左移
，说明A因子是（）。
14，一个酶的Km为3X10-5M，Vmax为转化8000克分子底物/分/克分子酶，底物浓度为3X10-5M
时，初速度是（）
15，在一个2底物-2产物酶反应系统中，对其中一个底物的Km值是（）。
16，一氧化碳有毒是因为（）。
17，胶原蛋白的特性是（）。
18，α螺旋与β折叠的区别（）。
19，促进酶分子催化反应的机制是（）。
20，酶可以改变（）。
21，转化丁二酸根为反丁二烯酸根所需要的酶是（）。
22，激素17β-雌二醇发挥效应的位置在（）。
23，3'-5'cAMP的性质是（）。
24，谷氨酸+丙酮酸=α酮戊二酸+丙氨酸，需要的辅酶为（）。
25，细胞液中脂肪酸的合成需要线粒体产生乙酸，乙酸是由（）带出线粒体膜。
26，氨对哺乳类细胞有害是因为（）。
27，U第一位上N原子来源是（）。
28，嘌呤生物合成关键步骤是（）。
29，当一个蛋白质样品不纯时，要测定它的性质，可用的方法有（）。
30，在同一细胞中，RNA和DNA杂交性质是（）。
31，DNA的Maxam-Gilbert化学法序列分析对底物的要求是（）。
32，单链DNA分子溶液形成双链的复性过程是（）级反应。
33，真核细胞中的RNA聚合酶III负责（）的合成。
34，DNA和RNA的差别在于（）。
35，一个操纵子的启动区产生一个降低的突变后会（）。
36，一个β珠蛋白mRNA的cDNA克隆可以在大肠杆菌中正确的进行肽的生物合成，而染色体基
因的克隆不能，这是因为（）。
37，分析了一个细胞中的蛋白质发现其Ile少于正常的情况，这是因为有好多Ile为Val所代替
，这可能发生了（）突变。
38，大肠杆菌核糖体的性质（）。
39，许多细胞含有一种酶，可以使DNA上少数C甲基化，产生5'-甲基-C，这种甲基化部位成
为CG转变成AG的突变热点，这是因为（）。
40，限制性内切酶的性质（）。
41，DNA生物合成的过程（）。
42，如由5'-脱氧尿嘧啶所引起的突变使一种嘧啶为另一种嘧啶所替换，这种转变叫做（
）。
43，假如一个mRNA样品，其G占29%，则C为（）。
44，在大肠杆菌中合成蛋白启始过程（）反应是必需的。
45，遗传密码的兼并性是指（）。
二，填空
1，蛋白质的最低自由能构型经常为--------残基之间的共价交连而加强。2，非极性环境中
，例如膜的内部，蛋白质可以折叠成--------侧链向外--------侧链彼此相互作用。
3，糖原异生受--------抑制，被--------激活。
4，由于--------调控--------酶而加速脂肪合成。
5，维生素B12是--------，它是--------酶的辅基，其作用是--------。
6，尿素循环中的调控酶是--------，存在于--------中，--------是此酶的正调节物。
7，由于--------酶的遗传缺陷使--------在尿中积累，加FeCl3使尿变成橄榄色。
8，由于--------酶的遗传缺陷使--------在尿中积累，见氧气变成黑色。9，膳食中------
--抑制--------酶从而影响胆固醇酯的合成。
三，问题
1，一个激素多肽链有29个氨基酸，顺序为Glu,Val,Lys,Asn,Cys,Phe,Arg,Trp,Asp,Leu,Gly
, Ser, Leu, Glu, Ala,Thr,Cys,Arg,His,Met,Asp,Gln,Cys,Tyr,Pro,Gly,Glu,Glu,Lys,
a,若没有二硫键存在，胰蛋白酶水解可有几个肽。
b,在PH7.5时激素净电荷是多少，若pKa值已知。
c,提出一个设计方案证明上述激素有二硫键。
2，为什么分子筛层析时小分子滞留时间长，而SDS电泳中小分子迁移得最快？
3，如何解释酶活性与PH的变化关系，假如其最大活性在PH=4或PH=11时，酶活性可能涉及那
些侧链？
4，写出下列生化反应式，并注明催化的酶及辅酶。
a, hydrolysis f, reduction of a double bond
b, Oxidative decarboxylation , g, isomerigation
c, phosphorolysis h, dehydration
d, non oxidative decarboxylation i, condensation
e, thiolysis j, phosphorylation
5,胃液大约PH2而分泌H+到胃中，分泌细胞内为PH7，假定H+梯度没有膜电势影响，计算形成
梯度的ΔG（RT=620卡/mol）。若ATP水解使H+分泌，计算每个ATP水解分泌的H+数目，若ATP水
解为-7.3千卡/克分子，细胞内ATP浓度为10-3M，ADP为10-5M和磷酸为10-3M.
6,T1核糖核酸酶水解一个纯的Trna，得到一个寡聚核苷酸，再用蛇毒二脂酶水解此寡聚核苷
酸，产生pA,pC,pU和U，其比例是1：2：2：1，仅靠此以及tRNA分子3'端核苷酸序列的知识，
请写出此寡聚核苷酸序列。
7，在设计测定酶活性实验时，希望测得的最初速度对底物浓度的小量波动并不敏感，S/Km应
该大于多少才能使底物浓度有10%差别时，所测得的初速度的误差小于1%？（假定符合米氏公
式）
8，你克隆了一个有机体的cDNA基因，并标记此cDNA作为探针。此基因在基因组中只含有一个
，并且基因上无插入序列，也无EcoR I位点。如用此探针去与EcoR I切割的基因组DNA south
ern 转移膜杂交。那么你最可能找到几条放射性条带？如果你把此机体基因组DNA的一个BamH
I片段克隆，并能与你原有的cDNA探针杂交。现在你用这个标记的BamH I片段去与刚才的sou
thern转移膜杂交，你得到了几条放射性条带。请用图示说明EcoR I和BamH I位点与此基因末
端的可能相互关系。

1989年生物化学
一，选择题
1，识别密码子GCU的反密码子为（）
2，拓扑异构酶I的功能为（）
3，真核生物RNA聚合酶I转录的RNA为（）
4，假如将15N标记的大肠杆菌在14N培养基种生长三代，提取其DNA 进行CsCl密度梯度离心，
其15N，14N杂和DNA分子与纯14N-DNA分子之比为（）
5，多数生物体内核糖核苷酸还原成脱氧核糖核苷酸发生在（）
6，氯霉素的抗菌作用是由于它（）
7，真核生物体内多肽链合成的第一个氨基酸为（）
8，用强酸性阳离子交换树脂分离氨基酸混合物时（PH3.0上柱）与树脂结合最牢的是（
）
9，竞争性抑制剂使 Vmax( ),Km（）
10，操纵子是（）
11，正协同效应的别构酶是Rs（）
12，用人工合成含有两种碱基的多核苷酸进行体外翻译，最可能形成的产物为（）
13，甲状腺素的作用是通过（）
14，有一大肠杆菌突变株，其DNA聚合酶III的3'-5'核酸外切酶活性缺陷，它将表现出（
）
15，糖异生的生理作用（）
16，从乳酸经糖异生形成葡萄糖共消耗（）ATP
17，用于多肽链专一性短裂方法中选择性最强的是（）
18，三羧酸循环中所有酶都位于线粒体的基质，除了（）
19，糖原是动物体内的多糖，它的结构特点是（）
20，三羧酸循环中异柠檬酸脱氢酶催化的反应，被（）影响
21，鱼藤酮阻断呼吸链是由于（）
22，厌氧条件下葡萄糖酵解产物是（）
23，油脂酰CoA通过β-氧化途径和TCA途径分解成CO2和H2O，共产生ATP数为（）
24．具有不同氧化水平的一碳单位载体是（）
25，糖原分解的调控（）
二，是非题
1，因为α螺旋是蛋白质构象稳定的重要因素，因此蛋白质活性部位通常在α螺旋区的表面（
）
2，糖皮质激素和肾上腺素都是提高血糖的激素（）
3，酶的Km值是酶的特征常数，它不随测定的PH和温度而改变（）
4，真核生物mRNA分子两端都有3'-OH（）
5，原核生物DNA为半不连续复制，真核生物DNA为全不连续复制（）
6，别构酶动力学曲线的特点都是呈S形曲线（）
7，多顺反子mRNA含有多个起始密码子和终止密码子（）
8，两条肽链反平行的β-折叠构象比平行的稳定（）
9，用SDS-PAGE电泳法测定蛋白质分子量是根据蛋白质分子所带的电荷量而定（）
10，紫外线照射可引起DNA两条互补链上的T之间形成二聚体（）
三，写出下列缩写的生化名称
ACTH Cot1/2 RQ FADH2 LDL
四，写出下列化合物的结构式
1，精氨酸
2，维生素C（还原型）
3，cAMP
4，蔗糖（透视式）
5， ψ
6，肌酸
7，分枝酸
8，卵磷脂
9， 11-顺视黄醛
10，甲状腺素
五，填空题
1，PH8.0时，ATP带--电荷。
2，tRNA的二级结构为--形，三级结构为--形。
3，NAD+和NADP+还原时，在--处有一个吸收峰。
4，当多肽键存在--残基时，α螺旋就被中断。
5，糖原合成酶D的别构调控物是--。
6，脂肪酸还原力的主要来源来是--途径。
7，丙酮酸脱氢酶复合物的调节控制的方式主要有--，--和--。
8，核酸复制时，DNA聚合酶沿模板链--方向移动；转录时，RNA聚合酶沿模板链--方向移
动；翻译时，核糖体沿模板链--方向移动。
9，预使酶反应速度达到Vmax的80%，此时底物浓度应是此酶Km值的--。
10，在厌氧酵解中每消耗1克分子葡萄糖需用2克分子无机磷，催化剂用无机磷反应的酶是-
-。
11，从乙酰CoA合成胆固醇的限速步骤是从--形成--，由--酶催化。12，催化氨基酸联
合脱氢酶是--和--。
13，维生素D的活性形式是--。
14，细菌的DNA连接酶以--为能量来源，动物细胞和T4噬菌体的DNA连接酶以--为能源。
15，在正常生理条件下，蛋白质分子中--和--侧链几乎完全带正电荷。
16，蛋白质生物合成时，生成肽键的能量来自--，核糖体在mRNA上移动的能量来源为--
。
17，胰凝乳蛋白酶的亲和标记试剂是--，它作用于该酶活性中心的--。
18，不能进行糖异生的氨基酸是--。
六，分析和计算题
1，有一氨基酸组成为Ala,Lys,Phe,的七肽，将它与FDNS反应，经酸水解后，生成游离的
DNP-Ala。将它用胰蛋白酶酶解，则得到一个三肽和一个四肽，它们的组成分别为：3Ala,Ph
e 和Lys,2Ala。将它用胰凝乳蛋白酶酶解，则生成一个六肽与一个游离的Ala。试写出其氨基
酸顺序。
2，今有以下4种蛋白质的混合物：（1）分子量12，000，pI=10；（2）分子量62，000，pI=
4；（3）分子量28，000，pI=7；（4）分子量9，000，pI=5；若不考虑其它因素，当它们（A
）流过DEAE-纤维素阴离子交换柱，用线性盐梯度洗脱时；（B）流经Sephadex G-50凝胶过
滤柱时，这些蛋白质的洗脱顺序如何？
3，若用14C标记下列化合物，经一次TCA循环后，试问14C出现在什么化合物的什么部位上？
（1） H310C---C---COO- (2)H3C-C---14COO-
|| ||
O O
4，假如突变导致脂肪细胞中过多产生依赖cAMP的蛋白激酶，试问影响脂肪酸代谢的突变效应
是什么？
5，已知cccDNA每结合一个嵌合染料菲啶溴红分子，双螺旋将解开26。左右，有一DNA制剂，
加入菲啶溴红使其沉降系数达到最低值，此时每个核苷酸平均结合菲啶溴红分子树为0.07，求
此DNA制剂的负超螺旋密度数值。
6，叶绿体在充分光照，25。C，PH7.0的条件下，ATP，ADP，和Pi浓度分别为100，1和100u
M
（1）计算合成1克分子ATP需要多少自由能。
（2）为了合成ATP一对电子传递的最低电位是多少？
7，某酶的Km为4.0X10-5M,Vmax=24微克分子/升/分钟，计算出当底物浓度为2X10-4M，非竞
争性抑制剂浓度为6.0X10-4M,如Ki为3.0X10-4M时的抑制百分数。
1991年生物化学
一．名词解释
拼接体复制子反馈调节别构效应抗体酶
二．英译汉
THF ddTPP ACTH Hbs tRNAm micRNA ACP NADPH ΔGo' Co
t1/2
三．填空
1.NAD+和NADP+还原时在--------增加一个吸收峰.
2.常用的DNA超螺旋结构的嵌合剂是--------
3.在癌变过程中同工酶谱发生--------
4.哺乳动物的必须脂肪酸为--------和--------
5.某些蛋白质前体都具有它的--------肽,它们大都相当于--------左右氨基酸的长度.残基
侧链一般是--------,位于肽链的--------末端.
6.糖蛋白中糖基与蛋白质肽链之间可通过酰糖苷键相结合,即--------和--------
7.DNA序列的末端终止法所用的工具酶是--------
8.E.ColiRNA聚合酶的亚基组成为--------,没有--------亚基的酶称为核心酶,该亚基的功能
为--------
9,线粒体DNA的复制为--------方式,大肠杆菌染色体的复制为--------方式,ΦX174环状染色
体和噬菌体λDNA后期复制为--------方式,真核生物染色体DNA复制为--------方式
10,呼吸链电子传递速度受--------浓度控制的现象称为--------
11,胆固醇合成的限速酶是--------,--------浓度升高其活性下降
12,嘧啶环由--------和--------合成的
13,丙酮脱氢酶系统受--------和--------.--------三种调节控制
14,神经递质5-羟色胺是由--------衍生而成
15,乙酰辅酶A进入三羧酸循环,还是形成酮体,由细胞中--------浓度决定
16,生物固氮是微生物利用--------转变成氨的作用
四,是非题
1,编码区的翻译效率彼此不同( )
2,酶的Kcat型抑制剂比Ks型抑制剂专一性更强( )
3,紫外线照射可使DNA互补双链间形成T^T( )
4,一个氨基酸残基就是一个肽单元( )
5,DNA复制需要RNA引物,RNA复制则不需要引物( )
6,蛋白质进化过程中构象是易变的( )
7,由于遗传的密码兼并性,一个氨基酸可以有几种tRNA,但常只有一种氨酰-tRNA合成酶( )
8,蛋白质在热力学上最稳定的构象是自由能最低的结构( )
9,当一种大肠杆菌突变型为DNA聚合酶III的3'-5'外切酶缺陷时,该突变型表现的特征为对
紫外线敏感( )
10,在酸性条件下,DNA分子上的嘌呤不稳定,易被水解下来( )
11,严重糖尿病患者因其糖异生作用加强血酮症( )
12,杀鼠药氟乙酸的毒性是由于其抑制了顺乌头酸酶从而阻断了三羧酸循环( )
13,无糖膳食中用含有奇数碳脂肪酸比含有偶数脂肪酸作为食物更好( )
14,高胆固醇血患者因服用β-谷固醇而引起血浆胆固醇水平升高,增加动脉硬化危险( )
15,若amytal和抗霉素A阻断呼吸链的抑制百分数相同,amytal的毒性更大( )
五,分析与计算
1,当谷氨酸C3上标记C14,氨基标记15N,在肝脏中氧化降解,同位素将出现在下列代谢物的哪个
原子上, (1),琥珀酸,(2),天冬氨酸,(3),精氨酸,(4),尿素
2,今有以下四种蛋白质的混合物:(1)分子量为15,000,pI=10;(2),分子量为62,000,pI=4;(3)
,分子量为28,000,pI=8; (4),分子量为9,000,pI=6;若不考虑其它因素,当(A)用CM-纤维素层
析柱分离时,(B)用Sephadex G50凝胶层析柱分离时,试写出这些蛋白的洗脱顺序
3,在以下修饰碱基中,何者在形成双链时氢键结合的性质不同于和它相关的普通碱基
(1)2-甲基腺嘌呤(2)5-甲基胞嘧啶(3)5-羟甲基胞嘧啶(4)1-甲基鸟嘌呤
4,假定下面的DNA双链分子是从右向左进行转录,写出RNA转录产物的序列
5'----ATTCGCTTAAGCAA----3'
3'----TAAGCGAATTCGTT----5'
5,某酶制剂的比活力为42单位/mg蛋白质,每ml含12mg蛋白质,
(1) 计算1ml反应液中含5μl酶制剂时的反应初速度
(2) 若1ml反应液内含5μl酶制剂,在10分钟内消耗底物多少?为保证测定酶的初速度,所需要
的最低底物浓度是多少?
6,有一酶分子使其变性后,用溴化氰降解,在降解产物种得到一个未知氨基酸顺序的九肽,试根
据以下实验结果,推断出此九肽的氨基酸顺序
(1) 氨基酸分析表明,它含有Ala,Arg,Cys,Glu,Lys,Met,Pro,Phe,
(2) 用Edman法降解得到一个Pro的衍生物
(3) 用胰蛋白酶水解得到一个游离Arg,一个二肽和一个六肽,此六肽在PH6.4时呈电中性状态
(4) 用胰凝乳蛋白酶降解得到一个二肽,一个三肽和一个四肽
A,二肽在PH6.4时呈负电荷
B,分析三肽发现里面含有硫
C,在PH6.4时分析四肽，静电荷为+2，在280nm分析表明不含有芳香氨基酸六．第一题非生化
专业，第二题生化专业。
（一）1．如何判明DNA制剂的纯度和是否为天然双链分子
1．如果细菌环状染色体的复制是双向的，并且从固定的复制起点开始，每个复制叉以16um
/min的速度移动，细菌染色体长1280um，完成整个染色体复制所需的时间是多少？当细菌在营
养丰富的培养基中每20分钟分裂一次，也就是说第一轮复制尚未完成就开始第二轮复制，此时
染色体有几个复制叉？
（二）1．利用标记的16SrRNA和未标记的细菌DNA进行分子表明，在饱和时100ugDNA能结合
0.071ug的16SrRNA（分子量为5.3x105）,该细菌Cell含有2.6x105道儿顿DNA.试计算每个细菌
基因组所含16SrRNA基因的拷贝数.
2.用琼脂糖凝胶电泳分离制备质粒, 分出三条带。请设计实验，判断何者是开环DNA，何者
为线形DNA，何者为闭环环DNA。

1992年生物化学
一. 名词解释
ribozyme .衰减子第二信使酮体钠钾离子泵
二. 英译汉
DHCL GHS cccDNA NADP GH MSH CGMP LTR ATCase PRPP
三填空
1. DNA的合成方向--------,RNA的转录方向--------,蛋白质合成方向--------
2. hnRNA经过RNA拼接过程去掉--------留下--------
3. 原核生物蛋白质合成的起始tRNA是--------,它携带的氨基酸是--------而真核生物蛋白
质合成的起始tRNA是--------,它携带的氨基酸是--------
4. 将重组DNA引入受体细胞这一过程称为--------
5. tRNA的二级结构呈--------形状,它的3'末端为--------,5'末端为--------
6. 胰岛素受体蛋白存在于--------
7. 胰凝乳蛋白酶的亲和标记试剂为--------,它作用于酶活性中心的--------
8. 维持蛋白质三级结构最主要的作用是--------
9. 高等动植物含有一个不饱和键的脂肪酸,其双键位置一般在第--------碳原子之间
10性激素与靶细胞受体结合后,进入细胞核与--------作用从而调节基因表达
11.维生素D3的活性形式是--------
12.纤维素和淀粉分子结构的区别在于,纤维素的葡萄糖分子是以--------连接而成,而淀粉是
以--------连接而成..
13.在脂肪酸生物合成中,酰基的载体为--------,在脂肪酸氧化中酰基的载体为--------
14.氨基酸代谢的一碳单位由--------供给,核苷酸生物合成中的一碳单位由--------供给.
15.糖酵解过程在细胞的--------部位进行,TCA循环在细胞的--------部位进行,氧化磷酸化
在细胞的--------部位进行.
四是非题
1.激素鸟二醇的原初作用在细胞核( )
2.在细胞培养物由供氧条件转为厌氧条件时葡萄糖利用速度增加( )
3.氰化物引起缺氧是由于抑制底物磷酸化( )
4.细胞液中脂肪酸的合成是需要线粒体产生乙酸而乙酸是由乙酰辅酶A将它带出线粒体膜(
)
5.所有蛋白质的克分子消光系数都是一样的( )
6.促甲状腺激素是由垂体前叶分泌的,含糖基的单链蛋白质( )
7.抑制剂对酶的抑制作用是酶变性失活的结果. ( )
8.糖苷键对碱稳定,而易被酸水解. ( )
9.限制性内切酶的生物学作用是分解外源DNA( )
10别构酶的动力学曲线特点是都为S型( )
11.DNA是遗传物质,而RNA不是遗传物质( )
12.双螺旋DNA复制后,子代DNA不含亲代成分( )
13.在蛋白质合成中,起始合成时起始tRNA结合核糖体的A位( )
14.每个原核细胞染色体上只有一个复制起点,而每个真核细胞染色体是有多个复制起点. (
)
15原核生物转录启动子有3个重要部位:-10区,-35区,SD序列( )
五．分析计算
1．含有一个九肽，分别用（1）胰蛋白酶（2）胰凝乳蛋白酶（3）羧肽酶（4）溴化氰处
理，试标出对肽链的作用部位
Leu Met Arg Pro Alu Lys Try Sen Thy
2.一个大肠杆菌中含有106个蛋白分子,假设每个蛋白分子,平均分子量为40000,并且所有分子
都处于a螺旋,试计算大肠杆菌中蛋白质肽链的长度.
3.1ug 纯酶(分子量为92000).在最适条件下催化反应速度为0.5umol/min,计算(1)酶的比活力
(单位/蛋白质) (2)转换数
4.请分别指出(1)DNA复制(2)RNA复制(3)蛋白质合成三个过程的忠实性如何保持的
5.用纯化的脂肪酸合成酶进行脂肪酸的合成(1)假设底物乙酰辅酶A的甲基为3H所标记,那么形
成的软脂酸(16:0)中哪些H原子将被3H标记.(2)假设用底物为丙二酰辅酶A,其两个H 都被标记
呢?
六. 附加题
1.E.Coli的一种体外蛋白合成系统中,由多聚核苷酸AUG UUU UUU UUU UUU 指导fMET Phe Ph
e Phe Phe 合成,在某种抗生素存在下,这个多聚物只能指导合成fMET Phe,试问1,这种抗生素
抑制了多肽合成的那一步.2,设有受抑制的寡肽或二肽，在合成终止时与什么tRNA相连？
2.假定有一只体重为250克的大白鼠,其呼吸强度为500vlO2/g体重/小时，请计算24H能产生多
少克ATP（ATP分子量为50）

1996年生物化学
一，填空
例，研究蛋白质空间结构的方法主要有----，----
二，计算
反竟争抑制动力学，ATP放能与H+( )关系的计算
三，问答
1，酶活调控的几种机制
2，凝血，溶血过程中参与的蛋白因子及作用
3，信号跨膜传导的方式有那些
4，尿素循环过程
5，末端甲基为14C标记的Met加入分裂旺盛的某菌中，几分钟后该菌的DNA中即掺入14C，问此
过程中发生了什么反应，此反应有什么生物学意义。

1997年生物化学
一，名词解释
ribozyme 别构效应
二，问答
1，密码子兼并性，从密码子推出各种反密码子。
2，蛋白质胶体在溶液中稳定的原因。
3， 5-氟尿嘧啶的抑制机制。
4，脂肪酸通过细胞膜（线粒体膜）的转运方式
5， 14C标记的Glucose在糖酵解和TCA循环中的降解顺序
三，计算
1， EMP途径中某一个酶的突变导致产生ATP的变化
2，利用米氏方程推导竞争性抑制公式

1999年生物化学
一．名词解释
米氏常数（Km）磷酸戊糖途径调节子酶辅助因子 cori循环与巴斯德效应滚动环复制
二．结构式
TPCK 尼克酰胺 GC配对 IP3
三．填空
1, 蔗糖是否为还原糖-----。
2，糖苷键的两种类型-----和-----。
3，DNA的一条链序列为GTCAATG，那么另一条链的序列为-----。
4，-----常数表征酶的催化效率。
5，ρ因子的催化活性是-----和-----。
6，常见的遗传缺陷病有-----，-----，-----，-----；常见的放射性标记的同位素是-----
，-----，
-----，-----。
7，DNA复制过程中动物是以-----为能源，E. Coli 以-----为能源。
8，生物体中产能最多的生化反应过程是-----。
9，-----发现TCA循环，-----发现化学渗透学说。
10，真核生物rRNA拼接过程中左端的拼接点顺序为-----右端为-----，切除-----结构。
11，生长激素是由-----产生的。
12，E．Coli DNA Pol I 经酶切，得到大小片段，其中大片段具有-----酶活性和-----酶活
性，
小片段具有-----酶活性。
13，必需脂肪酸有-----和-----。
四．回答
1，作动力学曲线区分酶的可逆性抑制与不可逆抑制？
2，比较ATP与ppi在磷酸键及生物学功能方面的异同。
3，真核生物至少需要31种tRNA才能识别61种密码子，而线粒体中tRNA只有22种，为什么？
4，阐明衰减子对操纵子的调控。
5，糖酵解和糖异生过程中涉及的不可逆反应和限速步骤。
五．计算
1，反竟争抑制和米氏方程。
2，酶活力，比活力，酶浓度。
3， DNA半保留复制。15NDNA在14N培养基上培养一代后，14NDNA与14N-15NDNA杂交分子之比
是多少？
4，正常DNA的超螺旋密度为-0.05，在无拓扑异构酶条件下当复制到超螺旋密度为0.07时，
由于正超螺旋的阻力而不能继续复制，求此时的复制百分数。
5， 2ADP===ATP+AMP
已知[ADP] [AMP] [ATP]
求：1，该反应的能荷。
2，Keq（各浓度为平衡态浓度）。
3， L=T+W,若a=-0,05，则DNA可以复制的百分比。
复旦98
一. 是非题(1.5/27)
1. RNA为单链分子,因此受热后紫外吸收值不会增加.( )
2. 单糖都符合(CH2O)n式( )
3. 蔗糖可以用来浓缩蛋白样品.( )
4. 促甲状腺素释放激素,生长素抑制激素,内啡肽和激肽都是神经激素( )
5. DNP的作用是抑制ATP的生长( )
6. 先天缺乏APRT可导致患者的自毁容貌综合症( )
7. 蛋白质与SDS充分结合后,不论分子量的大小,在溶液中的电泳速度是一样的( )
8. DTT为强烈的蛋白质变性剂( )
9. 利福平为原核RNA聚合酶的抑制剂( )
10. 任何一个蛋白质的紫外吸收的峰值都在280nm附近( )
11. 限制性内切酶是一种碱基专一性的内切核酸酶( )
12. Km值由酶和底物的相互关系决定( )
13. 双链DNA在纯水中会自动变性解链( )
14. Pseudogene指只有reading frame而没有调控元件( )
15. 分泌型蛋白质的信号肽中必须有碱性氨基酸( )
16. Pauling提出了蛋白质变性为氢键的破坏所致( )
17. 卡那霉素的作用为抑制DNA聚合酶的活性( )
18. 蛋白质中所有的氨基酸都是L型的.( )
二填空题(共44分)
1. 蛋白质的一级结构决定其三级结构是由美国________用_________的变性和复性实验来证明的
2. DNA的半保留复制机理是由Meselson和Stahl用________和__________的办法,于1958年加以证明的
3. a-螺旋中,形成氢键的环内共有________个原子
4. 正常生理条件下,蛋白质肽链上的_________和___________的侧链几乎完全带正电荷,而_______的侧链则部分带正电荷.
5. 出去蛋白氧品种盐分的方法一般为____________和__________.
6. 从mRNA翻译到蛋白,需要一套分子转换器,即_________分子,该理论是由______提出来的
7. Pribnow box是指________________________.
8. 人基因组DNA共有3x10^9个碱基,拉成一条直线长度为_______________cm
9. 双链DNA受热后260nm处的紫外吸收值增大,最多可以增加到_______倍,此现象称为____
10. 酶动力学实验中Vmax由__________决定
11. 酶一共可以分成___类,其中____________不需要富足因子或ATP分子的帮助
12. 胰凝乳蛋白酶在_____,______和_______的羧基端切断肽链
13. 糖的旋光性是由其结构中的_________所决定的,而糖有无还原性是由其结构中的_______所决定的
14. EMP途径得以进行必须解决________问题,生物可通过__________和_________来解决这一问题
15. 胞液中的一分子磷酸二羟丙酮经有氧分解最多可产生_________个ATP分子
16. 构成脂肪的脂肪酸中常见的必须脂肪酸有___________,___________和___________
17. 类固醇化合物都具有________母核结构,生物体内的类固醇化合物主要包括________及其酯,__________,_________及__________等
18. 参与转移和递氢的维生素有________,________,_________及_________,参与转酰基的维生素是_________和__________,转移和利用一碳单位的维生素是_______和_________.
19. I型糖尿病是由于________代谢障碍引起的病变,患者先天缺乏__________.
20. 人体嘌呤碱的分解产物是,过量产生会引起人类的_______,_______对______发生作用而治疗者一疾病.
21. 胰岛素分泌的激素有______和_______;对糖的作用前者表现为________,后者表现为________
二. 综合题(共29分)
1. 生物体如何弥补由于TCA用于合成代谢造成的C4缺乏?(8分)
2. 核酸代谢的研究有那些可用于抗癌药物的设计上?(8分)
3. 已知DNA的260/280值为1.8,RNA的260/280为2.0.今有一不含蛋白等杂质的核酸纯品,其260/280值为1.9,是问一克该样品中RNA和DNA各含多少?(注:1OD260的DNA为53微克,1OD260的RNA为40微克) (8分)
4. 现有五肽,在280nm处有吸收峰,中性溶液中朝阴极方向泳动;用FDNB测得与之反应的氨基酸为Pro; carboxy-peptidase进行处理,的质地一个游离出来的氨基酸为Leu; 用胰凝乳蛋白酶处理得到两个片段,分别为两肽和三肽,其中三肽在280nm处有吸收峰;用CNBr处理也得到两个片段,分别为两肽和三肽;用胰蛋白酶处理后游离了一个氨基酸;组成分析结果表明,五肽中不含Arg.
试定该短肽的氨基酸序列.(5分)
　

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